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【电针对APP/PS1双转基因小鼠海马Aβ蛋白的影响】

发布时间:2020-07-01 21:48:53  来源:专业分子生物实验外包公司医学科研实验外包国自然课题整体动物实验外包app/ps1双转基因小鼠价格优惠db/db小鼠Samp8小鼠原理背景模型构建现货购买SCI英文论文润色翻译期刊投稿发表信息服务平台  浏览:   【】【】【


【摘要】:Aβ级联学说是目前比较公认的阿尔兹海默病(AD)发病机制假说之一。该学说认为AD发病的关键点在于脑内Aβ水平的增高。脑内Aβ主要通过血脑屏障清除、酶蛋白降解、脑实质细胞降解等方式清除。低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP1)是Aβ血脑屏障清除途径中Aβ的关键转运受体。LRP1是多种蛋白的膜受体,可直接与Aβ结合,也可与载脂蛋白E (apoE)/A β及α2巨球蛋白(α2M)/Aβ等复合物结合,从而实现脑内Aβ经血脑屏障的外流转运。LRP1水平下降会导致Aβ在脑内的堆积,加速AD的病理发生过程。APP/PS1双转基因鼠是AD的常用模型之一,该小鼠5月龄出现老年斑(SP),并随年龄增长脑组织出现LRP1mRNA的减少。AD的病性为本虚标实。肾虚偏衰、邪毒阻络是导致神明失用的内在机制。Aβ脑内清除障碍会导致脑微血管壁Aβ形成、脑内Aβ低聚物大量聚集,导致认知功能障碍,这类似中医所说的“邪毒阻络、神机失用”。“醒神、益肾、祛毒、通络”可能是治疗老年痴呆的中医机理,该机理能为针刺实验研究提供依据。

针刺可能通过影响LRP1的表达,促进Aβ清除出脑,改善学习记忆力。为此,本研究以针刺“百会”、“涌泉”穴有“醒神、益肾、祛毒、通络”作用为中医机理,以APP/PS1双转基因小鼠为AD动物模型,观察针刺对其学习记忆行为学改变及脑内Aβ水平的影响,对Aβ血脑屏障清除途径主要转运蛋白LRP1及其mRNA相对表达量的影响,以探求针刺干预AD的作用机制,证明针刺可通过调控LRP1基因表达,提高LRP1水平,促进Aβ转运、清除出脑。实验目的采用“百会”、“涌泉”配穴干预APP/PS1双转基因鼠,探索电针对脑Aβ水平及血脑屏障Aβ转运途径的关键受体LRP1及其mRNA的可能影响。实验方法本实验以4月龄APP/PS1双转基因鼠为AD动物模型,将24只APP/PS1双转基因鼠随机分为模型组(M)和电针治疗组(EA),每组12只;以12只同月龄同窝转基因阴性鼠为正常对照组(C)。电针治疗组针刺“百会”,电针正、负电极分别接左、右侧“涌泉”穴,采用疏密波,频率为1/50Hz,强度0.5mA。每次针刺持续15min,隔日1次,针刺6周。模型组、正常对照组除不针刺外,其它处理与电针治疗组相同。干预治疗后,以Morris水迷宫观察APP/PS1转基因鼠学习记忆行为学变化,以空间学习记忆行为学相关指标显示电针干预AD的治疗效果。酶联免疫吸附(ELISA)定量检测海马A β1-42、Aβ1-40水平,蛋白质免疫印记(WB)、实时荧光定量PCR(rt-PCR)分别检测海马LRP1蛋白水平、LRP1mRNA水平,以观察电针对Aβ血脑屏障清除途径转运蛋白LRP1及其r(?)RNA的影响,为说明电针干预AD的疗效及机制,提供实验依据。实验结果1.Morris水迷宫行为学测试结果示:各组逃避潜伏时、经过平台次数、平台象限时长差异没有统计学意义(P0.05);2.ELISA法检测结果示:模型组海马A β 1-42、A β 1-40表达水平及Aβ1-42/Aβ1-40比值均显著高于正常对照组(P0.01);电针治疗组海马A β1-42、A β1-40表达水平、A β 1-42/A β 1-40比值均显著低于模型组(P0.01);3.蛋白免疫印迹检测结果示:模型组海马LRP1蛋白相对表达量低于正常对照组(P0.05);与模型组比较,电针治疗组海马LRP1相对表达量差异无统计学意义(P0.05);4.实时荧光定量PCR检测结果示:模型组海马LRP1mRNA相对表达量低于正常对照组(P0.05);与模型组比较,电针治疗组海马LRP1、LRP1mRN A相对表达量差异无统计学意义(P0.05)。

结论电针未能提高5月龄APP/PS1双转基因小鼠海马LRP1基因的翻译与LRP1蛋白表达,但能显著降低海马内Aβ水平。电针降低AD脑内Aβ的机制,仍需要进一步探讨。

【学位授予单位】:北京中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015

【分类号】:R245


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